当前位置: 首页 > >

肺癌细胞HK-Ⅱ、CRABP1基因的表达及意义_论文

发布时间:

山东 医药 2 1 年 第 5 01 1卷第 1 期  肺 癌细 胞 H 一 C A P K Ⅱ、 R B 1基 因 的表达 及 意 义  杨 芳  柳 , 俊  韩玉 翠  刑 莎莎  岳武娟  胡玲 玲h , , , ,   ( 1安康 学 院农 学 与生命科 学学 院, 陕西安康 750 2安 康 市中心 医院 ) 200;   摘要: 目的 探讨 Q 6 G 6人 肺扁*上 皮癌细胞 , T Pa2人肺 腺癌细胞 , C- 4 0人 大细胞 肺癌 细胞 己糖 激  L E —_ N IH 6 利用 R —C TP R法检测 三株肺癌 细胞 H - K  酶. H .1 和视 黄酸结合蛋 白 1 C AB 1 基因的表达及 意义 。方法 Ⅱ( K 1) (R P) Ⅱ和 C AB 1基因的表达情况。结果 H 一 R P K Ⅱ和 C A P 基 因在三株肺 癌细胞 中均 明显表 达 , 健康人 血细胞 中  RB1 在 不表达。结论 H一 K Ⅱ和 C A P 基 因在肺癌细胞 中的表达水*较正常细胞呈增高趋势。 R B1   文 献标 志码 :  B 文 章 编 号 :0 22 6 2 1 ) 1 0 70   10 - X(0 1 0 - 3 - 6 0 2 关键词 : 肺肿瘤 ; 己糖激酶 ; 黄酸结合蛋 白质类 ; 因表达  视 基 中 图分 类 号 : 7 4 2 R 3 .  活跃 的糖 酵解代谢是恶性肿瘤细胞显著 的生 化特  13 R —C .  TP R法检 测 HK I和 C A P 基 因 的表 达  —I RB1 征 。己糖激酶.( K1是调节细胞糖酵解的关键 限速  1 H .) I t 酶 。视黄酸结合蛋 白 1 C A P ) 细胞 液 中视黄 酸  ( R B 1是 按照 R A提 取 试剂 盒 , T P R试 剂 盒说 明 书提  N R —C 取细胞总 R A 并合成 e N N , D A。根据 G n ak eBn 提供  的人 H .I R A C A P mR A、 —c n mR A K 1  m N 、 R B 、 N Bat   N   i 分子与细胞核上视黄酸核受体之间互相作用 的重 要物  质 。20 O9年 7月 ~ 00年 7月 , 实验通过 检测人 肺  21 本 癌细胞 以及健 康人外 周血 细胞 H -和 C A P 基 因  KI I RB1 的表达情况 , 以探讨其在肺 癌中的表达及意义 。   1 材料 与方法  序 列设 计合 成引物 。取 5t C   l R扩 增产 物 用 15 xP .%  琼 脂糖 凝 胶 进 行 电泳 分 析 。将 H —I C A P K I 、 R B 1和  1at  TP R 产 物 琼脂 糖 电泳 片 段 用 D A 回收  3 cnR —C 一 i N 试 剂盒 回收 , 和 p . ay载体 连 接 。将 重组 质  并 MD Tes 11 材 料 .  Q -6人肺 扁 * 上皮 癌 细胞 ,T P a   G5 L E —- 2 粒转 人 大肠杆 菌 D 5 接种 到含青 霉 素 的 L H a, B培养  人肺腺癌 细胞 , C— 40人 大 细胞 肺 癌 细 胞 , 购  N I 6 H 均 自中国科 学 院。R A提 取 试 剂 盒 , T P R试 剂 盒  N R —C 购 自杭州 博 日生物公 司。Pi eT R r S A @H   N   o   m SD A P 1 . 基*板并挑取单菌落 , 重组质粒经 P R鉴定后 , C 送  上 海生 工测序 。   2 结 果    y eae购 自大连 宝生物 工程公 司 ;MD Tes 体  m rs p —  y载 a 购于 Po e a 司 。P R产 物 纯 化 试 剂 盒 购 自 O   rm g 公 C — ME A公 司。 G   2 1 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 结 果  Bat 、 —1和  .  —cn HK I i C A P 三种 e N 的 预 期 扩 增 片段 大 小 分 别 为 : R B1 DA   Bat .c n基 因 目 的 片 段 2 2 b , K Ⅱ基 因 8  p  i 4  p H 一 lb , C A P 基 因 4 9b , T P R产 物 与预期 目的基 因  R B1 4  p R —C 1 2 细胞 培养 . N I 40用 含 1% 胎牛 血清 、 .  C— 6 H 0 15 gL碳 酸氢 钠 、.  / / 4 5g L葡 萄 糖 、0m o L H P S  1  m l   E E 、 / 10m o/ .  m LL丙酮 酸 钠 和 2m o/   m lL谷 氨 酰胺 的 R — P  M 14 I50培养基 , G 5 Q 一6和 L E —- T Pa 2用含 1%胎 牛 血  0 清的 R M 14 P I6 0培养基 , 于 3  5 C   和湿度  均 7o % O 饱 C、 片 段 大 小相 符 合 ( 图 1 2 3 。测 序 结果 与 G n  见 ,,) e— Bn a k比对 一致 。   2 2 H .I C A P  N 的表 达  H 一 .   K I和 R B ImR A K Ⅱ和  C A P  N R B 1mR A在三 株 人 肺 癌 细 胞 中 明 显 表 达 , 而  培养箱 中培养 。实验选用对数 生长期细胞 。   在健 康人血 细胞 中未见 表达 。见 图 123  、、 。 图 1  ̄at   -C 产 物 琼 脂 糖 凝  图 2 HK-I -C 产 物 琼 脂 糖 凝  圈 3 C A P   T P R 产 物 琼 脂 糖  ei RTP R n   IRT P R     R B lR - C 胶 电泳 分 析  。   胶 电



友情链接: